La nuit, Gotham City est protégée par Batgirl (Barbara Gordon), fille du commissaire James Gordon et bras droit de Batman. Elle s'efforce de capturer et d'arrêter Catwoman, Poison Ivy et Harley Quinn.
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Arleen Sorkin
Harley Quinn / Dr. Harleen Quinzel (voice)
Diane Pershing
Poison Ivy / Dr. Pamela Isley (voice)
Tara Strong
Batgirl / Barbara Gordon (voice)
Adrienne Barbeau
Catwoman / Selina Kyle / Renée Montoya (voice)
